Иммуноферментный анализ крови что это такое

Как проводится и что показывает иммуноферментный анализ

Современная диагностика в медицине немыслима без высокочувствительных лабораторных анализов. Прежде для установления причин тех или иных симптомов врачи были вынуждены ориентироваться на косвенные признаки болезни, а также проводить многоступенчатые микроскопические исследования в попытке обнаружить возбудителя инфекции. Сегодня достаточно одного-единственного теста — такого как иммуноферментный анализ — чтобы подтвердить или опровергнуть первоначальный диагноз.

Основные понятия и принцип метода иммуноферментного анализа

Иммуноферментный анализ (ИФА) — это метод лабораторной диагностики, основанный на реакции «антиген-антитело», который позволяет выявить вещества белковой природы (в том числе ферменты, вирусы, фрагменты бактерий и другие компоненты биологических жидкостей).

Чтобы понять, как устроен иммуноферментный анализ, попробуем разобраться в сути реакции «антиген-антитело». Антиген — это чужеродная для организма молекула, как правило, белкового происхождения, которая может попасть в тело человека вместе с инфекционным агентом. Частицы чужой крови (если она не совпадает с нашей по группе) также являются антигенами. В организме антигены способны вызывать иммунную реакцию, направленную на защиту целостности внутренней среды от чужеродных веществ. Поэтому наше тело синтезирует особые вещества — антитела (иммуноглобулины), способные по принципу «ключ к замку» соединяться с антигенами, связывая их в иммунный комплекс (этот процесс как раз называется реакцией «антиген-антитело»). Такие иммунные комплексы легче распознаются и уничтожаются клетками иммунитета.

Существует несколько разновидностей антител, каждая из которых вступает в действие на определенном этапе иммунного ответа. Так, первыми в ответ на проникновение антигена в организм синтезируются иммуноглобулины класса М (IgM). Содержание этих антител наиболее высоко в первые дни инфекционного процесса.

Следом за ними иммунная система выбрасывает в кровь иммуноглобулины класса G (IgG), которые помогают уничтожать антигены до полной победы над инфекцией, а также продолжают циркулировать по сосудам в дальнейшем, обеспечивая иммунитет к повторному заражению. На этом явлении основана вакцинация: благодаря прививкам, содержащим ослабленные антигены микробов и вирусов, в нашей крови появляется большое количество IgG, которые при контакте с реальной угрозой быстро подавляют инфекцию — до того, как она нанесет вред здоровью.

Также существуют иммуноглобулины класса А (они в большом количестве содержатся в слизистых оболочках, защищая «подступы» к организму), Е (борются с паразитарными инфекциями) и другие. В лабораторной диагностике объектами интереса чаще всего являются IgM, IgG и IgA: по их концентрации можно оценить, на какой стадии находится инфекционный процесс, а также узнать, болел ли когда-либо человек тем или иным недугом (например, краснухой или ветряной оспой).

Как узнать, какие именно антигены или антитела присутствуют в организме человека? Когда врач предполагает, что причиной заболевания является определенная инфекция, или желает измерить концентрацию определенного гормона, он назначает пациенту иммуноферментный анализ.

Реакцию «антиген-антитело» можно воспроизвести в лабораторных условиях: использовать уже готовые антитела или антигены, чтобы определить, есть ли в исследуемом образце соответствующее им соединение.

Для начала необходимо получить образец биологической жидкости — обычно, это сыворотка крови. Лаборатория использует пластиковые планшеты с лунками, в которых уже содержатся очищенные антигены предполагаемого возбудителя (или — антитела, в случае если задачей является поиск антигена). Образцы вносятся в лунки, где происходит — или не происходит — образование иммунных комплексов. Если «встреча» состоялась, особое красящее вещество вступает в ферментную реакцию с объединенной молекулой, что позволяет с помощью инструментальной оценки оптической плотности сделать выводе о результатах анализа.

ИФА бывает качественным и количественным. В первом случае подразумевается однозначный ответ: искомое вещество или найдено, или не найдено в образце. В случае с количественным анализом более сложная цепь реакций дает возможность оценить концентрацию антител в крови человека, что в сравнении с результатами предыдущих тестов даст ответ на вопрос о том, как развивается инфекционный процесс.

Это интересно Предшественником иммуноферментного анализа был радиоиммунный анализ, в котором для идентификации успешной реакции использовались меченые антитела и антигены. Поскольку проведение такой диагностики представляло потенциальную угрозу для здоровья сотрудников лаборатории, ученые озаботились поиском безопасной альтернативы по «окраске» образцов. Так в 1971 году был изобретен ИФА.

Преимущества метода

Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.

ИФА во многом заменил «золотой стандарт» микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке. Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни.

Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

Недостатки метода

К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.

В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека.

ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Показания к назначению и выявляемые заболевания

Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА. Вот наиболее распространенные цели анализа:

1. Диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний:

• IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С;
• IgG к ВИЧ;
• Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции;
• Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр;
• Ig M и IgG к герпетическим инфекциям;
• Ig M и IgG к токсоплазмозу;
• Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям;
• IgG к паразитарным заболеваниям;
• Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем;
• IgG к хеликобактерной инфекции.

Общая оценка показателей иммунитета человека и маркёров некоторых аутоиммунных заболеваний.

Выявление онкологических маркёров (фактора некроза опухоли, простатспецифического антигена, раково-эмбрионального антигена и других).

Определение содержания гормонов в сыворотке крови (прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других).

Анализируемый биоматериал и особенности его забора

Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.

Сроки готовности результатов ИФА

При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.

Расшифровка иммуноферментного анализа

Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).

Анализируемые показатели

• IgM — наличие этого класса иммуноглобулинов говорит об остром инфекционном процессе в организме. Отсутствие IgM может говорить как об отсутствии конкретного возбудителя в организме, так и о переходе инфекции в хроническую стадию.
• IgA при отрицательном результате теста на IgM чаще всего свидетельствует о хронической или скрыто протекающей инфекции.
• IgM и IgA ( совместное присутствие ) — два положительных результата говорят о разгаре острой фазы заболевания.
• IgG говорит либо о хронизации заболевания либо о выздоровлении и выработке иммунитета к инфекционному агенту.

Возможные результаты ИФА

В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный). Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце.

Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).

Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.

ИФА: как проводится анализ? Стоимость. Расшифровка результатов

Высокоточные методы анализа — неотъемлемая часть современной медицины и, в частности, диагностики. Доступные в наше время методы диагностики дают возможность своевременно выявить не только сам факт наличия, но и количество паразитов в организме пациента.

Сейчас, как правило, пациентам предлагается пройти всего один тест — иммуноферментный анализ.

Применение анализа крови ИФА

Иммуноферментный анализ — узкоспециализированный вид анализа, который проводится в условиях лаборатории. Анализ основан на реакции организма, обычно называемой «антиген-антитело».

Метод анализа, основанный на данном показателе, даёт точность в 99%. Это самый точный из известных сейчас методов. В практике почти не было случаев, когда такой анализ выдавал ложные результаты.

Этот метод позволяет выявить:

• значительное количество инфекционных болезней, вызываемых паразитами;
• наличие разных видов онкомаркеров;
• в репродуктивной медицине — наличие белков, гормонов и пептидов, необходимых для оценки фертильности пациента;

Достоверность результатов теста зависит от нескольких факторов:

• конкретная разновидность паразита;
• количество паразитов в организме;
• скорость их размножения.

В каких случаях применяется данный вид анализа?

Иммуноферментный анализ широко используется в диагностике самых разных заболеваний. Главная его ценность в том, что он позволяет с высокой точностью выявлять болезни, протекающие бессимптомно.

Как известно, такие болезни нередко бывает проблематично обнаружить на ранней стадии и, соответственно, вовремя начать лечить.

Какие заболевания диагностируют при помощи иммуноферментного анализа:

• онкологические заболевания;
• инфекции, передающиеся половым путём (ВИЧ, хламидиоз, сифилис, уреаплазмоз, герпес и другие заболевания);
• туберкулёз, корь, токсоплазмоз, гепатиты и так далее;
• гормоны щитовидной железы;
• половые гормоны;
• различные аутоиммунные расстройства;
• аллергические реакции и непереносимость отдельных продуктов питания.

На каких факторах основан ИФА?

Данная процедура помогает выявить:

• заражение организма бактериями и вирусами;
• белковую основу;
• глистные инвазии;
• инородные тела.

Собственно, процедура ИФА складывается из двух частей:

1. иммунный ответ;
2. ферментативная реакция.

Суть принципа «антиген-антитело» заключается в том, что возбудитель заболевания или инородное тело, то есть антиген, поступает в организм постепенно вместе с источником заражения. Этот процесс вызывает так называемый иммунный ответ, предназначенный для защиты организма от инородных элементов.

Проявления такой защиты зависят от самого антигена и от симптомов вызванной им болезни. Данная схема и получила название «антиген-антитело».

Для большей достоверности диагностики вся процедура иммуноферментного анализа проводится только в лабораториях и медицинских центрах. С пробой крови взаимодействуют различные антигены и антитела.

С целью выявления как вида, так и количества паразитов в организме пациента применяется иммуноглобулин классов «А» и «Е», который реагирует на паразитарные инвазии.

Такой анализ должен выявить:

Что представляет собой иммунная реакция и как определяется узнаваемость антигена?

Иммунная реакция показывает биологические связи в молекулах клеток микробов, на наличие которых и проводится анализ. Иммунная реакция как таковая — это только один из компонентов комплексной программы ИФА, второй же компонент — это ферментная реакция.

Узнавание антигена происходит в процессе контакта клетки иммунной системы (иммуноцита) с чужеродной клеткой. Индивидуальные особенности антигенов служат для иммунной системы средством распознавания «свой-чужой».

Какие бывают антитела?

Фактически, антитело:

• Это просто молекула, расположенная на поверхности иммуноцита.
• Эта молекула и используется для распознания чужеродных клеток.

Передача полученной информации об антигене происходит на клеточном уровне. Связь разрушается, если клетка иммунная, если же нет — организм запускает естественную защитную реакцию.

Современной науке известны 5 классов антител, иначе называемых иммуноглобулинами или белковыми структурами.

Для обозначения антител используются латинские буквы: A, D, E, G и M.

В результатах анализов эти обозначения выглядят так:

Процедура иммуноферментного анализа

В первую очередь необходимо подготовить специальные планшеты из полистирола, которые содержат 96 лунок. Перед анализом стенки каждой ячейки обрабатывают адсорбирующим антигеном.

В обработанные ячейки капают сыворотку крови. Гомологичные антитела и антигены реагируют друг с другом, образуя прочные связи. Не прикрепившиеся тельца вымываются. Затем в лунки добавляются антитела иммуноглобулинов вместе с помеченными особым образом ферментными элементами.

Реагенты помечаются для облегчения идентификации антител в анализируемой сыворотке. Хромогенный элемент, который ускоряет реакцию и подкрашивает лунки, добавляется после промывания. Интенсивность окраски по сравнению с изучаемым ферментом показывает примерное процентное содержание антигена в пробе крови.

Затем лаборант использует оптическую жидкость, чтобы:

• замерить концентрацию антител в лунках;
• сравнить полученный результат с контрольной пробой, то есть эталоном;
• подсчитать концентрацию антител при помощи специальной шкалы.

Для анализа на глистные инвазии используется особый вариант системы тестирования, со своим набором показателей нормы и отклонений от неё.

Подготовка к анализу

Забор сыворотки крови для иммуноферментного анализа проводится только в условиях лаборатории. Берут кровь из вены, удаляют оттуда элементы, способные повлиять на процесс анализа и точность его результатов. Сдают анализ утром на голодный желудок.

Расшифровка результатов иммуноферментного анализа

Качество и количество антител говорит о присутствии чужеродных элементов в организме пациента, в том числе болезнетворных микроорганизмов. Эти же признаки указывают на то, что в организме начался воспалительный процесс.

Пример расшифровки результатов ИФА:

Стадия заболевания	IgA	IgM	IgG
Первичная (2 недели с момента инфицирования)	+	—	—
Первичная (2,5-3 недели с момента инфицирования)	+	+	—
Первичная (3-4 недели с момента инфицирования)	+	+	+
Обострение хронической фазы (2 недели с начала обострения)	+	—	+
Хроническая	+/-	—	+
Прошедшая (инфекция излечена)	—	—	+
Выздоровление	Титр снизился в 2-4 раза после успешного лечения	—	Титр снизился в 4-8 раза спустя 1-1,5 месяца после успешного лечения
Результат отрицательный	—	—	—

Сам по себе количественный анализ, проведённый данным методом, ещё не даёт возможность точно диагностировать болезнь, назначить курс лечения и определить дозировку препаратов.

Плюсы и минусы ИФА

У всех методик тестирования, даже самых передовых и высокоточных, к сожалению, кроме преимуществ, есть и свои недостатки.

Преимущества иммуноферментного анализа:

• Специализация метода диагностики;
• Повышенная чувствительность этого метода;
• Применение новейших технологий.

Чувствительность метода диагностики — это высокая вероятность обнаружить искомое, даже если его концентрация в исследуемом материале крайне мала.

Специфичность методики означает:

• высокую степень достоверности, то есть отсутствие риска получить ложный результат. Если результат положительный, то пациенту гарантировано, что обнаружен именно тот вид паразитов, от которого он страдает;
• влияние на результат «человеческого фактора», то есть возможных ошибок лаборанта, сведено к нулю, что также способствует повышению точности.

Возможные недостатки данного метода анализа:

1. Он предполагает определение природы болезни, то есть интуитивно «угадать» правильный диагноз в данном случае невозможно;
2. Высокая стоимость анализа.

Сравнение дуоденального и прямого иммуноферментного анализа

В процедуре ИФА напрямую используется способность антител находить антиген, образуя связи с метками. Данный способ анализа считают промышленным, время ожидания результата составляет не более часа.

Особая метка-субстрат проявляется после ферментации. Уровень антител соответствует доле антигенов в исследуемом биоматериале.

Существует также дуоденальный (иначе — непрямой) метод исследования на паразитарные инвазии, который широко применяется, несмотря на высокую точность ИФА.

Дуоденальный (непрямой) иммуноферментный анализ проводится в 2 этапа:

1. Сначала сопоставляют помеченные антитела с искомыми антигенами;
2. Применяют помеченные антитела к непомеченным, обнаруженным на предыдущей стадии.

Таким образом достигается двойной контроль антигенов и антител, увеличивающий достоверность анализа.

При непрямом ИФА в лаборатории антиген фиксируют на поверхности лунки, он образует связи с немеченной частью антител.

Достоинства дуоденального метода:

• Двойной контроль изучаемого биоматериала, что значительно повышает точность;
• Повышенная точность и специфичность самого метода анализа.

Однако, данный способ занимает много времени и предполагает некоторое количество дополнительных действий. Тем не менее, точность исследования настолько высока, что она оправдывает этот недостаток. По этой причине большинство врачей рекомендуют именно дуоденальный метод анализа.

Куда обращаться, как долго ждать и сколько платить?

При наличии всего необходимого инструментария и расходных материалов можно будет получить результат уже через 2 дня после сдачи. Если в лаборатории есть услуга экспресс-анализа, то обработать пробу могут всего за 3-5 часов.

Где можно сдать ИФА:

• в государственной поликлинике;
• в частных клиниках.

Расценки на иммуноферментный анализ напрямую зависят от уровня цен в конкретной клинике, в среднем его цена составляет не менее 4000 рублей.

Сведения, полученные в результате этого исследования, могут стать полезным вкладом в медицинскую науку, однако, пациенту следует помнить, что, поскольку стоимость иммуноферментного анализа так высока, разумнее будет доверить эту процедуру надёжной проверенной временем клинике.

К сожалению, государственные медицинские учреждения не всегда бывают оборудованы по последнему слову науки. Необходимых приспособлений для качественного забора биоматериала и его обработки в районной поликлинике может и не быть.

Итак, чем полезен для пациента иммуноферментный анализ крови:

• позволяет обнаружить глистную инвазию ещё на ранней стадии;
• как следствие этого, позволяет своевременно начать лечение;
• устойчивость методов даёт возможность проводить анализ с равной точностью у детей и у взрослых.

Иммуноферментный анализ демонстрирует не только качественный, но и количественный фактор, то есть не только указывает на сам факт наличия гельминтов в организме пациента, но и даёт возможность оценить их число.

ИФА анализ — что это такое, расшифровка иммуноферментного анализа крови на паразитов, сифилис, ВИЧ, туберкулез. Норма в таблице, результаты

Благодаря развитию современной медицины, врачу при постановке диагноза больше не нужно ориентироваться на косвенные проявления заболеваний или проводить многоступенчатые лабораторные исследования. Достаточно провести один анализ, который подтвердит или опровергнет предполагаемый первоначальный диагноз.

Таким методом является иммуноферментный анализ (ИФА) — это исследование позволяет обнаружить специфические антитела и антигенны свойственные при разнообразных патологиях, что во многом ускоряет установку диагноза.

Что такое ИФА

ИФА анализ — это такое лабораторное исследование (метод), которое помогает определить присутствие или отсутствие определённых антител в организме для борьбы с вирусом и их количество.

Основой исследования является естественная реакция антиген (вредоносный организму объект) – антитело (белок уничтожающий вредоносные объекты), позволяющая выявить присутствие разнообразных вирусов, бактерий.

ИФА представляет собой естественный иммунный ответ организма – взаимодействие антитела с соответствующим антигеном. Так во время ИФА в пробирку с материалом добавляются поочередно антигены или антитела, после чего происходит выявление концентрации получившихся комплексов антиген-антитело.

Если совпадения образовались, то возникают иммунные комплексы, далее происходит ферментная реакция красящего вещества с объединённой молекулой. Именно благодаря изменению цвета в ходе ферментативной индикации происходит идентификация заболевания после исследования уровня определяемого соединения.

Виды иммуноглобулинов

Иммуноглобулины человека дифференцируются на несколько классов, отличающихся друг от друга свойствами, структурой и антигенными особенностями тяжелых цепей (Н-цепи). У всех млекопитающих, в том числе и человека, выделяют пять Н-цепей, которые и определяют принадлежность иммуноглобулинов к соответствующему классу: G, М, A, D, Е.

Каждый класс отличается друг от друга биологическими свойствами, и способностями связывать антигены, и скоростью и прочностью связи с молекулой.

Функции каждых иммуноглобулинов (lg) различны:

	Кол-во в организме	Функции	Период полураспада (дней)	Значение
G	70%	Формируют пассивный иммунитет у новорожденного; необходимы для иммунного ответа улучшают фагоцитоз,	21-24	обеспечивают длительный гуморальный иммунитет при инфекционных заболеваниях
М	5-10%	нужны для активации фагоцитоза, способны связать 5 молекул антигена,	5	Обеспечивает первичную иммунную реакцию
А	10-15	Нейтрализуют токсины и вирусы нужны для формирования раннего иммунитета Образование местного иммунитета	4-5	Защита слизистых оболочек
Е	0,2%	вызывают аллергию и анафилаксию активируют тканевые базофилы	2	Защита от паразитов
D	0,2%	задействованы в выработке лимфоцитов, необходим как мембранный рецептор для антигенов;	3	Их роль малоизучена

Возникновение иммуноглобулинов происходит по своеобразной «цепочке» — lgM lgG, именно так реагирует организм на появление в организме антигена. Во время лабораторной диагностики проводится оценка концентрации трех основных иммуноглобулинов – G, M, A.

Показания к сдаче анализа на иммуноглобулины

ИФА-анализ с каждым годом становится все более популярным.

Такое исследование ускоряет постановку диагноза, а это очень важно для терапии таких патологий как:

• вирусный гепатит;
• ВИЧ-инфекция;
• цитомегаловирус,
• вирус Эпштейна-Барр,
• вирус герпеса,
• корь
• краснуха,
• туберкулез,
• сальмонеллёз,
• дизентерия,
• клещевой энцефалит,
• бактерии хеликобактер,
• боррелиоз,
• столбняк,
• сифилис,
• дифтерия,
• лептоспироз,
• хламидиоза,
• уреаплазмоз,
• микоплазмоз,
• коклюш.

Так же анализ позволяет определить инфицирование паразитами:

• плоскими червями
• аскаридами
• гистолическими амебами,
• печеночными тремадами,
• лямблиями,
• токсоплазмами,
• трихинеллами,
• двуусткой,
• цестодозами.

ИФА является своеобразным маркером аутоиммунных патологий и злокачественных новообразований.

Подготовка к сдаче анализа

При подготовке к исследованию следует придерживаться таких правил:

• за сутки до забора крови нельзя курить и употреблять алкоголь,
• не заниматься спортом или другими физическими нагрузками,
• стараться не допускать стрессов,

  Перед тем как сдать ИФА анализ, нужно избегать стрессов.

• прекратить употребление лекарственных средств не позже чем за 10 дней до манипуляции.

Так же врачи рекомендуют придерживаться специальной диеты – исключить жирную и жареную пищу, а если исследование проводится на гепатиты, то необходимо не употреблять любые оранжевые овощи и особенно цитрусовые. Сдавать кровь следует с утра на голодный желудок.

Ложноположительным анализ бывает из-за невыполненных рекомендаций, особенно употребления жирной пищи, что приводит к слишком большой концентрации триглицеридов в плазме, из-за чего проводимость ИФА снижается.

Порядок взятия пробы

В качестве исследуемого материала может использоваться цельная кровь, сыворотка или плазма венозной крови. Забор материала, обычно проводится из локтевой вены, для этого применяется одноразовая игла и вакуумная пробирка, необходимо 5-10 мл крови.

Для точности результата важно придерживаться правильной техники взятия пробы – прокол самого сосуда и окружающих тканей должен быть произведен одной манипуляцией, поэтому используется короткая игла с большим диаметром, благодаря чему не травмируется противоположная стенка вены и не повреждаются эритроциты.

Так же для сохранения целостности эритроцитов, нужно чтобы кровь стекала по стенкам пробирки.

Во время хранения материала следует избегать возможной его ионизации, кроме того материал не должен контактировать с остатками дезинфицирующих средств, поэтому используется только одноразовая пластиковая пробирка, с маркировкой ФИО пациента, датой и временем сдачи материала.

Если необходимо непродолжительное хранение исследуемого материала, то используется холодильная камера с температурой 2-4 оС, если необходимо более продолжительное хранение, то материал замораживается при температуре -20 оС.

Как делают анализ

После подготовки исследуемого материала врач-лаборант приступает к необходимым манипуляциям. Для этого используются ряд специальных наборов антигенов, обдающих свойством спровоцировать ответные реакции организма на раздражитель, это разнообразные инфекции, гормоны, аллергены.

Схема ожидаемой реакции «антиген-антитело» выглядит приблизительно так:

• Первичная реакция — определяемый Ig (Ab) и очищенный антиген возбудителя (Ag).
• Для обнаружения получившихся иммунных комплексов далее следует новая иммунологическая реакция, где антигеном выступает связанный специфический Ig, а антителом для него выступает коньюгат- Ig (Ab).
• Последний этап — ферментативная реакция, вместе с катализатором молекулой коньюгата. Субстратом выступает хромоген (не окрашенный), который в процессе протекания реакции окрашивается, и интенсивность цвета и определяется количественный показатель иммуноглобулина в пробе.

В настоящий момент разработано множество разнообразных вариантов ИФА, четкая классификация их отсутствует. Обычно, методы рассматриваются исходя из разделения её на гетеро- и гомогенные — все фазы анализа происходят с применением твердой фазы или с использованием только раствора.

Современные клинико-диагностические лаборатории обычно используют гетерогенный (твердофазный) ИФА, в нем под твердой фазой подразумевается абсорбция антигенов или антител на твердой поверхности специальных лунок, расположенных на полистироловом микропланшете, метод подразделяется на прямой и непрямой ИФА.

При прямом ИФА, вносимый антиген закрепляет в период инкубационного процесса на поверхности пустых лунок, для этого исследуемые пробы материал помещают в чистые лунки на 20-25 минут, это нужно для прикрепления антигена к их поверхности. После этого происходит добавление необходимого антитела. Далее материал остается на определенное время для образования связей.

Антитела всегда добавляют в избытке, поэтому даже при их наличии в пробе остаются не связанные антигены, а если антигенов нет совсем, то связей не будет. Чтобы удалить«лишние» антитела проводится декантация, после чего остаются только те антитела, которые создали связь с антигеном.

После этого следует ферментативная реакции – добавление в лунки раствора с ферментом, после чего происходит окрашивание полученных связей.

При непрямом методе ИФА используемые антитела, заранее соединенные с субстратом ферментативной реакции; в этом случае связь антител с антигеном происходит в период инкубационного процесса, после чего происходит мобилизация связей на поверхности лунок, а вносимый после конъюгат и субстратно-хромогенный реагент окрашивают реакцию.

Таким образом, главным отличием непрямого от прямого метода является не приклеивание материала к поверхности чистых лунок, а связывание с антигеном, иммобилизованным на планшете.

Останавливается протекание реакции с применением специализированных устройств, далее каждая лунка подвергается процессу фотометрирования, за которым следует сравнительная характеристика полученного результата с проведенными ранее контрольными пробами.

Если обнаруживается повышение оптической плотности в пробе, то завышена и концентрация специфических антител в исследуемом результате.

Когда будет готов анализ

Проведение исследования не занимает много времени, от забора крови до получения результата проходит от 1 до 10 дней, в зависимости от диагностических мероприятий.

Результаты теста и их расшифровка

На полученном пациентом бланке-результате диагностики указывается отрицательный либо положительный результат на определенные классы иммуноглобулинов, так же указывается количественный показатель различных классов антител.

Возможны различные интерпретации результатов:

1. IgM (+) (IgA, IgG не определялись) – процесс выздоровления;
2. IgM (-) ;IgG (+), IgA (+) – хроническая инфекционная патология;
3. IgM, IgG, IgA (все с – значением) – отсутствие защитных механизмов к инфекциям;
4. IgG (+/-) и IgA (+/-), IgM (+) – острый процесс;
5. IgM (-), IgA(-),IgG(+) – постинфекционный иммунитет;
6. IgM, IgG, IgA (+) – хроническая патология в стадии обострения.

Так, например, если были обнаружены IgG и IgM, то возможно у пациента одно из таких заболеваний:

• вирусный гепатит;
• цитомегаловирус;
• герпес;
• ветряная оспа;
• хламидиозом;
• стафилококковая или стрептококковая инфекция.

Иммуноферментный анализ часто назначается при гормональных исследованиях, нормы показаны в таблице:

	Название гормона	Пол	Норма
1	тиреоглобулин	м/ж	До 70 МЕ/мл
2	тироксин	м/ж	64-146 нмоль/л
3	трийодтиронин	м/ж	1,8-2,8 нмоль/л
4	Свободный тироксин	м/ж	11-25 пмоль/л
5	Свободный трийодритонин	м/ж	4,49-9,3 пмоль/л
6	Тестостерон, дегидротестостерон	Ж	0,5-10 мЕд/л

ИФА анализ — это такое диагностическое исследование, которое позволяет оценить вероятность образования онкологических патологий. Однако интерпретация результатов проводится только лечащим врачом.

Значение результатов теста

ИФА подходит для выявления разнообразных форм половых инфекций, в том числе сифилиса, часто используется и для скрининга беременных.

Благодаря этому исследованию можно узнать, как давно произошло заражение и стадия заболевания на момент исследования:

• иммуноглобулины М говорят о длительности заболевания;
• IgA — пациент заразился более 30 дней назад;
• IgG обнаруживается на «пике» заболеваний, или же в тот момент, когда терапия окончилось недавно.

В процессе исследования лунки на планшете с отрицательным показателем остаются бесцветные, а положительные окрашиваются в ярко-желтый цвет. Если цвет положительных лунок не совпадает с цветом контроля, то результат считается сомнительным и необходимо повторное исследование.

Иммуноферментный анализ — это первая ступень в диагностике ВИЧ. Проводить анализ нельзя сразу же после предполагаемого заражения необходимо дождаться окончания инкубационного периода (от 14 дней до 6 месяцев).

В ходе анализа определяются антитела к ВИЧ-1 и ВИЧ-2, происходит поиск АТ класса G, который обычно появляется на более поздних сроках и АТ класса А и М, они могут быть определены на ранних стадиях (во время инкубационного периода).

При получении положительных проб далее следует:

• если первый тест дал положительный результат, то кровь вновь перепроверяется другим лаборантом;
• повторный положительный результат предполагает пересдачу материала,
• при повторении результата, пациенту назначается иммуноблотинг.

Окончательный вывод о наличии ВИЧ-инфекции выдается только после результата иммуноблотинга.

ИФА также применяется в качестве диагностического исследования туберкулеза, но если у пациента даже и были выявлены антитела к данной патологии, то это не всегда подтверждает наличие у него туберкулеза, поэтому ИФА часто применяется качестве уточняющей методики, либо же для диагностики скрытой внелегочной формы.

ИФА анализ — это такое исследование, позволяющее обнаружить у пациента заражения паразитами и простейшими, в ходе диагностики можно определить даже время заражения.

Хламидии	Цитомегаловирус	Паразиты
IgM –обнаруживается через 7 дней после инфицирования,	IgM обнаруживаются через 30-45 дней после заражения, либо во время реактивации инфекции в течение 4-6 месяцев	В ходе исследования определяются IgMЕ. IgG- хроническая стадия инвазии
IgA – заражение произошло более 30 дней назад
IgG – инвазия находится в острой фазе
IgG – подтверждает диагноз и показывает эффективность терапии

Плюсы и минусы анализа

ИФА имеет множество достоинств, что и объясняет его популярность среди врачей и пациентов, это:

• высокая точность результата,
• доступная цена,
• быстрый результат,
• выявление стадии заболевания,
• контроль заболевания в динамике.

Однако наравне с достоинствами существует и недостаток – в редких случаях анализ бывает ложноположительным или ложноотрицательным.

Почему результат может быть недостоверным

Ошибки в результате могут возникать из-за технических нарушений, так же недостоверным анализ бывает у людей с некоторыми хроническими заболеваниями (ревматоидный фактор) для которых характерной является выработка специфических антител.

Так же на конечный результат оказывает влияние употребление пациентов медикаментов и нарушение метаболизма. По данным причинам положительный результат на ВИЧ и онкопатологии требует повторную сдачу проб.

Стоимость исследования

Цена ИФА варьируется в зависимости от направления диагностики (руб.):

• гепатит 250 -900;
• вирусы – 250 -1000;
• ВИЧ – 250-350;
• глистные инвазии – 280 — 900;
• сифилис -150-250;
• грибковые инфекции 400-500.

Иммуноферментный анализ крови один из самых эффективных методов исследований множества вирусных патологий, паразитарных инфекций, онкологических патологий. Такое исследование как ИФА во многом облегчает постановку диагноза, однако этот анализ не должен интерпретироваться пациентом самостоятельно, заниматься расшифровкой должен только врач.

Автор статьи: Bacio

Оформление статьи: Лозинский Олег

Видео о ИФА анализе

Как выполняется анализ ИФА:

ИФА – иммуноферментный анализ крови: расшифровка

Метод диагностики (ИФА) является информативным и не слишком затратным, поэтому многие лаборатории предлагают своим клиентам данный метод (иммуноферментного анализа крови). Исследование проводится натощак, кровь для анализа берут из локтевой вены пациента. Перед ИФА желательно не курить и не употреблять алкоголь.

Что такое анализ крови, проводимый  методом ИФА

Среди методов анализа крови, позволяющих оценить способность организма противостоять инфекционным болезням и  показывающих фазу болезни, важное место занимает иммуноферментный анализ (ИФА). Проведение этого исследования позволяет всесторонне оценить деятельность защитной функции крови и выявить состояние иммунодефицита при инфекционных патологиях, также заболеваниях крови, аутоиммунных процессах, гормональных проблемах.

Это лабораторное исследование, которое позволяет определять наличие специфических антител (защитных факторов крови белковой природы) к определенным антигенам (болезнетворным агентам). Среди антител первостепенное значение имеют иммуноглобулины, которые могут существовать в виде иммунокомплексов.

Иммуноглобулины вырабатываются вследствие сложных нейрогуморальных  реакций  иммунитета человека, возникающих как ответная реакция на внедрение чужеродных антигенов. На каждый вид болезнетворного агента вырабатываются свои специфические антитела. Действуют они путем «связывания» антигена или патологического микроорганизма, образую комплексное соединение «антиген-антитело» с последующей нейтрализацией, ферментативным лизисом, реакциями фагоцитоза и выводом из организма.Именно по наличию определенных комплексов методом ИФА определяется вид возбудителя или имеющегося у больного вредного вещества.

Из-за низкой цены и использования в качестве биоматериала крови, метод применяется в качестве скрининга. Например, при подозрении на паразитозы пациенты сдают кровь на определение антител к аскаридам, лямблиям и т.д. Если результат пришел положительным, то не стоит сразу приступать к лечению паразитов – необходимо сопоставить клиническую картину, результаты ИФА и, возможно, результаты других методов обследования.

Стоит помнить, что после пройденного курса лечения антитела могут оставаться в нашем организме очень долго, даже после того, как инфекция покинула наше тело, т.е. остается, так называемый, «серологический шрам». Приведем пример: в ночном небе тысячи звезд. Многие из этих звезд уже давно погибли, но до нас до сих пор, веками, идет их свет. По сути, мы видим только след звезды. Свет есть, а звезды уже давно нет.

Но если света нет, это не говорит о том, что звезды там не было. То же самое и с антителами. Их наличие не гарантирует присутствия в организме искомого инфекционного агента. Отсутствие антител не говорит о том, что инфекции нет. Если результат анализа методом ИФА положительный, то это значит, что нужно искать инфекцию более специфическими и дорогостоящими методами — ПЦР, бактериологические посевы. Возможен ложноположительный результат в случае, если несколько микробов обладают схожей антигенной структурой, тогда к разным микробам будут вырабатываться «похожие» антитела.

Какие бывают иммуноглобулины

Открыто и изучено 5 основных классов иммуноглобулинов – IgА, IgM, IgG, IgD, IgE.  роль остальных еще до конца не выяснена и она находятся в стадии научного исследования.

Основная задача иммуноглобулина А (IgA) заключается в защитных функциях слизистых оболочек дыхательных путей, желудочно-кишечного тракта и мочевыделительной системы. При остром начале заболевания выявить их невозможно. Появляются эти защитные комплексы лишь со 2 недели начала заболевания, иногда позже. Основная масса иммуноглобулина А сосредоточена в слизистых тканях. Ориентировочно около 80%. Остальные антитела циркулируют в крови.

Основная функция – обезвреживание и уничтожение микроорганизмов. После стихания острых проявлений заболевания количество этих иммуноглобулинов начинает уменьшаться и полностью уходит на сроке до 8 недель после начала болезни. Если IgA обнаруживаются в более поздние сроки, то это свидетельствует о хронизации процесса.

Главными и первыми маркерами острой фазы развивающейся патологии являются иммуноглобулины класса М (IgM). Обнаруживаются они к 5 суткам начала недомогания. Определить их наличие в крови можно около 6 недель. Затем они начинают быстро исчезать.

Остаточный иммунный ответ характеризует наличие в крови иммуноглобулинов класса G (IgG). Появление этих факторов в крови обнаруживается примерно через месяц после начала болезни. В дальнейшем они могут определяться в течение многих месяцев, лет и даже всю жизнь, выполняя защитную функцию от возврата (рецидива) болезни, а в некоторых случаях делая невозможным  вторичное развитие патологии.

Если же количество иммуноглобулина G начало вновь расти, то можно подозревать повторное заражение. Подобный вывод можно сделать путем проведения двух-трех проб, сделанных с промежутком в 2 недели.

Иммуноглобулин Е (IgE) используется в практике паразитологии.Иммуноглобулин D (IgD) располагается на B-лимфоцитах, находится в небольшой концентрации у здоровых людей. После 10 года жизни достигает максимальных значений. Количество иммуноглобулина D увеличивается при беременности, у больных системными заболеваниями соединительной ткани, бронхиальной астмой, заболеваниями, вызванные иммунодефицитным состоянием.

Как проводится ИФА крови

Для иммуноферментного анализа в большинстве случаев используется кровь пациентов, иногда производят забор ткани стекловидного тела, жидкости спинномозгового канала, околоплодных вод.

Кровь набирают через инъекционную иглу в шприц из локтевой вены. Исследование проводят натощак. Следует помнить, что прием некоторых медицинских препаратов может влиять на результат анализа. Перед сдачей крови необходимо воздержаться от курения, приема алкоголя. Исказить результаты может прием наркотических веществ.

В случае отрицательных значений иммуноглобулинов IgM, IgG, IgA можно говорить об отсутствии заболевания или его начальной фазе, также результат с минусами возможен при полном выздоровлении по прошествии значительного количества времени.

Если IgA и IgM не обнаружены, а IgG проявляется положительно, то по всей вероятности речь идет о сформированном иммунитете после инфекционного заболевания, или после прививки.

Если IgA и IgM не обнаружены, а IgG проявляется положительно, то по всей вероятности речь идет о сформированном иммунитете после инфекционного заболевания, или после прививки

В случае высокого титра IgM при отрицательных значениях IgG, IgA можно делать вывод о наличии остро протекающего инфекционного заболевания.

Одновременные положительные значения результатов иммуноглобулинов – IgA, IgM, IgG характерны для острой фазы рецидива имеющегося хронического заболевания.

Для хронической инфекции, находящейся в фазе стихания процесса (ремиссии) ИФА показывает отрицательные значения иммуноглобулина M (IgM), при этом результат иммуноглобулинов G (IgG) и A (IgA) будет положительным.

Иммуноферментный анализ от паразитов методом ИФА

ИФА –  это аббревиатура от «иммуноферментный анализ на паразитов». Она подразумевает под собой медицинское тестирование иммунной системы человека. В основу теста положена способность антител к изменению их цвета. Данный способ диагностики имеет множество положительных черт. Например, он способен обнаружить огромное множество болезней, причинами которых послужило заражение инфекцией. Наибольшую эффективность он проявляет в случаях заболеваний, вызванных паразитическими организмами.

Что дает представленная технология: определение наличия гельминтов в крови; поиск других болезнетворных микроорганизмов в теле; можно узнать причины ухудшения вашего здоровья; лечение строится также на анализах, полученных таким способом; вы можете следить за состоянием своей иммунной системы.

Еще одна хорошая черта – возможность отслеживать онкологические маркеры вне зависимости от их происхождения, но при условии их присутствия в организме, разумеется. Данный тест пригоден и для описания состояния репродуктивной системы человека. Наличие определенных белков, гормонов и пептидов, позволяют судить о потенциале партнера в плане зачатия ребенка, а также предположительном качестве будущего плода.

Анализ крови на лямблии – довольно популярная практика у современных медиков. К тому же, данный метод исследования является прекрасным инструментом для биомедицинской аналитики и количественной статистики в плане специфичных антигенов.

Каким образом используется иммуноферментный анализ методом ИФА

Будет большой ошибкой перепутать способ анализа ИФА с методом зондирования и последующего изучения кала. Последние проводятся при помощи методов на микроскопическом уровне, когда берется сданный пациентом образец кала, либо же он отбирается у потенциального больного непосредственно в медицинском учреждении. В образце пытаются обнаружить глистные инвазии и другие компоненты, так или иначе связанные с жизнедеятельность паразитов. Изучаются не только микроскопические паразитирующие организмы, но и их остатки, их яйца и личинки.

Расшифровка ИФА может не дать вам полного понятия проблемы, поэтому лучше всего проконсультироваться с врачом или лаборантом.Также ошибочно полагать, что данный способ актуален лишь в том случае, если гельминты паразитируют в кишечнике. Диагностике подвергаются и многие другие органы – паразиты могут жить в двенадцатиперстной кишке, желчевыводящих путях, печени и даже в поджелудочной железе.

Правда, это более сложные случаи, поэтому качество подобного анализа будет сильно зависеть от работников лаборатории, выполняющей тестирование. Особенности технологии и отличие ее от старых лабораторных исследований:

• теперь вместо пробы кала используется кровь, для определения наличия гельминтов;
• изучение пробы проводится в лаборатории очень быстро, уже на следующий день можно получить полную информацию;
• стоимость лабораторного исследования недорогое, так как теология очень проста;
• анализ крови на гельминтов дает высокие показатели точности.

Актуальность и правдоподобность результатов теста прямопропорциональны квалификации медицинского персонала, технической оснащенности лаборатории, а также отсутствия какой-либо халатности или невнимательности у медиков. Однако, даже самый внимательный и ответственный лаборант испытает огромные трудности, если паразит присутствует в организме в его минимальной популяции, либо же выполнил кладку непосредственно в момент проведения тестирования.

Анализы при иммунологическом анализе крови методом ИФА

О том, какие бывают анализы крови с точки зрения иммунологической системы человека, мало кто знает, так эти анализы не так распространены. Как правило, такое исследование крови дает информацию о вирусе иммунодефицита в организме человека и является анонимной, так как проводится по желанию пациента.

В основном, для проведения ИФА анализа, исследуемым биологическим материалом является кровь, однако, исследованию может подвергаться спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и др.

Для забора используют взятую натощак из вены кровь, из которой для исследования методом центрифугирования получают сыворотку. Кроме этого, изучение сыворотки крови способно выявить ряд венерических заболеваний (сифилис, герпес, хламидиоз), а также все виды гепатита, корь, краснуху, паротит и токсоплазмоз.

В основном, для проведения ИФА анализа, исследуемым биологическим материалом является кровь, однако, исследованию может подвергаться спинномозговая жидкость, содержимое стекловидного тела, околоплодные воды и др.

Иммуноглобулины — это иммунные молекулы, способные связываться и нейтрализовать большинство инфекционных возбудителей и токсинов в организме. При этом важнейшей характеристикой иммуноглобулинов является их специфичность, то есть способность связываться с определенным антигеном. Именно это свойство используется для проведения анализа крови на иммуноглобулин.

Существует пять типов иммуноглобулинов, однако наиболее изученными являются иммуноглобулины А, М, и G. Иммуноглобулины М и G проявляют свою активность в крови. Иммуноглобулины А являются, своего рода, барьером на поверхности слизистых оболочек, так как присутствуют там в большом количестве.

Иммунологический анализ крови позволяет определять тип иммуноглобулинов, благодаря этому ИФА позволяет не только диагностировать заболевание, но и определить стадию данного и отслеживать динамику заболевания:

• в первые 2 недели заболевания обнаруживаются только иммуноглобулины А;
• со 2-й по 3-ю неделю заболевания в крови обнаруживаются иммуноглобулины А и М.;
• Сс3 по 4 неделю анализ крови на иммуноглобулин  определяются все три типа;
• при выздоровлении в крови пропадают иммуноглобулины М, а количество А и G снижается в 2 – 4 раза;
• при наличии хронического процесса в крови обязательно присутствуют иммуноглобулины G, иммуноглобулины М отсутствуют, иммуноглобулины А могут как присутствовать, так и отсутствовать.

Область применения иммунологического анализа крови методом ИФА

• Диагностика вирусных заболеваний: гепатиты, герпес, Эпштейн-Барр вирус, цитомегаловирус и др;
• инфекции передающиеся половым путем: хламидиоз, гонорея, трихомонада, микоплазма, уреаплазма;
• сифилис; эндокринология (определение уровня гормонов);
• онкомаркеры (диагностика онкологических заболеваний); иммунология (диагностика иммунодефицита);
• аллергология (диагностика и лечение аллергий).

Серологический анализ крови — лабораторный метод исследования крови, который применяется с целью диагностики инфекционных заболеваний и определения стадии инфекционного процесса. Серологическая реакция основана на взаимодействии антител и антигенов.

Определение антигенов используют для определения родовой и видовой принадлежности микроорганизмов. Данный метод исследования применяется в урологии и венерологии. Кровь для серологического анализа крови берется утром натощак из вены.

Показания к назначению и выявляемые заболевания методом ИФА

Основной биоматериал для проведения ИФА — это сыворотка крови: в лаборатории у пациента берут образец крови из вены, из которого в дальнейшем удаляют форменные элементы, затрудняющие проведение анализа. В некоторых других случаях для анализа используется спинномозговая жидкость, околоплодные воды, мазки слизистых оболочек и т.д.

Для того чтобы избежать искажений в результатах, рекомендуется сдавать кровь натощак, а за две недели до исследования (если целью является диагностика хронических, скрыто протекающих инфекционных заболеваний) необходимо отказаться от приема антибиотиков и противовирусных препаратов.Невозможно охватить полный список показаний к проведению ИФА.

Вот наиболее распространенные цели анализа:

• диагностика острых и хронических инфекционных заболеваний: IgM и IgG к вирусным гепатитам А, B, C, E, а также антигенов гепатитов В и С; IgG к ВИЧ; Ig M и IgG к цитомегаловирусной инфекции; Ig M и IgG к вирусу Эпштейна-Барр; Ig M и IgG к герпетическим инфекциям; Ig M и IgG к токсоплазмозу;
• Ig M и IgG к кори, краснухе, сальмонеллезу, дизентерии, клещевому энцефалиту и другим заболеваниям; IgG к паразитарным заболеваниям; Ig M и IgG к инфекциям, передающимся половым путем; IgG к хеликобактерной инфекции. Общая оценка показателей иммунитета человека и маркёров некоторых аутоиммунных заболеваний. Выявление онкологических маркёров (фактора некроза опухоли, простатспецифического антигена, раково-эмбрионального антигена и других). Определение содержания гормонов в сыворотке крови (прогестерона, пролактина, тестостерона, тиреотропного гормона и других).

Преимущества метода ИФА

Бесспорные преимущества ИФА — высокая чувствительность и специфичность метода. Чувствительность — это возможность распознать искомое вещество, даже если его концентрация в образце невысока. Специфичность же подразумевает безошибочность диагностики: если результат положительный, значит, найдены именно те антитело или антиген, которые предполагались, а не какие-то другие.

ИФА во многом заменил «золотой стандарт» микробиологии — бактериологический метод диагностики, в ходе которого для идентификации возбудителя требовалось выделить его из организма, а затем в течение нескольких дней выращивать культуру на питательной среде в пробирке.

Все то время, пока производился анализ, врачи были вынуждены лечить пациента «вслепую», догадываясь о происхождении микроорганизма по симптомам болезни. Определение IgM с помощью ИФА позволяет поставить точный диагноз уже в первые дни болезни.

Высокая степень технологичности проведения иммуноферментного анализа минимизирует влияние человеческого фактора, что снижает вероятность ошибки. Большинство используемых в современных лабораториях тест-систем и реактивов для ИФА выпускаются в промышленных условиях, что гарантирует точный результат.

Недостатки метода ИФА

К сожалению, для проведения ИФА нужно знать, что именно искать: методика анализа подразумевает, что врач заранее имеет предположение о природе заболевания. Поэтому нет смысла назначать такой тест в надежде случайно «угадать» диагноз.

В случае диагностики инфекционных заболеваний иммуноферментный анализ не может найти возбудителя и определить его специфичные свойства: он лишь указывает на наличие антител в крови у больного, косвенно свидетельствующих о присутствии чужеродного микроорганизма в теле человека. ИФА — крайне точный, но не дешевый метод, поэтому обращаться к нему нужно с умом, а интерпретацией результатов должен заниматься квалифицированный врач.

Возможные результаты ИФА

В зависимости от содержания анализа в бланке могут быть представлены данные в виде таблицы с перечислением всех антител или антигенов с пометками об отрицательной или положительной реакции, либо будет указано количественное значение результата (отрицательный, слабоположительный, положительный или резко положительный).

Последний вариант определяет, сколько антител содержится в анализируемом образце. Еще один количественный показатель — индекс авидности антител, выраженный в процентах. Он указывает, сколько времени прошло от начала инфекционного процесса (чем выше индекс — тем больше).

Сегодня выпускаются тысячи видов тест-систем ИФА, позволяющих обнаруживать специфические антитела и антигены при самых разных патологиях. Поэтому этот анализ используется практически во всех медицинских отраслях. Диагноз, поставленный с помощью ИФА, — это гарантия назначения адекватной терапии и эффективного лечения заболевания.

При наличии необходимых реактивов и хорошей организации работы лаборатории результат анализа вы получите в течение 1–2 суток после забора крови. В некоторых случаях, при необходимости получения экстренного ответа, этот срок может быть сокращен до 2–3 часов.

Результатом качественного ИФА будет однозначный вердикт: искомое вещество либо найдено, либо не найдено в образце. Если же речь о количественном анализе, то концентрация может выражаться числовым значением или определенным количеством знаков «+» (от одного до нескольких).

Узнайте больше:

Анализ крови на паразитов - информативный метод диагностики

По материалам - http://neparazit.ru, http://simptomy-lechenie.net, http://diametod.ru

Иммуноферментный анализ крови - описание метода, преимущества и недостатки, расшифровка результатов

Содержание

Рассказать ВКонтакте Поделиться в Одноклассниках Поделиться в Facebook

Современная диагностика не обходится без лабораторных высокочувствительных анализов. Раньше для установления причины заболевания и обнаружения возбудителя инфекции врачи проводили разные микроскопические многоступенчатые исследования. Сегодня, чтобы опровергнуть или подтвердить первоначальный диагноз, надо сделать единственный тест – иммуноферментный анализ (ИФА). Данное лабораторное исследование помогает оценить состояние здоровья человека и диагностировать гематологические, онкологические, аутоиммунные, инфекционные патологии.

Что такое иммуноферментный анализ крови

Метод иммуноферментного анализа – это современное лабораторное исследование крови на присутствие в ней антигенов, антител к возбудителям и вирусам болезни. Метод ИФА помогает врачу выявлять этиологию заболевания, определять ее фазу, давность происхождения, уровень опасности для человека и вносить в лечение необходимые корректировки. Чаще других при иммуноферментном анализе исследуют наличие антител групп M и G. Что они из себя представляют?

При попадании патогенного микроорганизма в кровоток, иммунная система включает защитную реакцию в виде выделения антител (иммуноглобулинов). Эти вещества связываются с клеткой и выявляют, является ли она частью организма или пришла извне. Если система установила, что микроорганизм чужеродный, то число антител возрастает с целью борьбы с болезнетворным вирусом. Иммуноглобулины (Ig) бывают нескольких видов: одни появляются в период инфицирования, другие остаются на протяжении всей жизни, вырабатывая стойкий иммунитет. Антитела в медицине обозначаются: A, D, E, M, G.

Методом ИФА исследуют кровь, хотя существует и другие виды иммуноферментного анализа. Как правило, они различаются типом взятой жидкости, на основании которой далее проводится изучение состава и определение наличия антигенов. При этом для исследования берется как кровь человека, так и другие жидкости:

• содержимое стекловидного тела;
• слизь из цервикального канала и уретры;
• околоплодные воды;
• мазки;
• спинномозговая жидкость.

Показания к назначению

Иммуноферментное исследование крови помогает выявить онкомаркеры (факторы раково-эмбрионального антигена, некроза опухоли, аденомы простаты и других). Также анализ определяет недуги щитовидной железы, исследуя гормональные включения в сыворотке крови (пролактина, прогестерона, тиреотропного гормона (ТТГ), тестостерона). ИФА помогает выявить наличие поражения организма кишечными паразитами и гельминтами. Кроме того, исследование назначают пациентам, у которых необходимо определить наличие следующих заболеваний:

• аллергических реакций;
• иммунодефицита;
• недугов вирусного происхождения (гепатит, герпес, вирус Эпштейна-Барр, цитомегаловирус);
• венерических болезней, передающихся половым путем ЗППП (уреаплазма, сифилис, трихомонада, хламидиоз, микоплазма);
• болезней печени;
• нейросифилиса (инфекционное поражение ЦНС (центральной нервной системы)).

Анализ крови на ИФА часто проводится во время предоперационного комплексного обследования для определения уровня гормонов и оценки качества проводимого лечения. Высокая точность полученных данных помогает врачу иметь представление о развернутой картине состояния здоровья. При этом получение результатов происходит за короткий временной промежуток, что позволяет отслеживать динамику развития заболевания.

Преимущества метода

Бесспорными плюсами метода ИФА крови является высокая чувствительность, т.е. возможность определить искомое вещество, даже при малой его концентрации; и специфичность, подразумевающая безошибочность диагностики. Кроме того, исследование сыворотки крови методом ИФА имеет следующие преимущества:

• возможность проведения процедуры во время беременности;
• расшифровка результатов помогает выявить стадию и развитие заболевания;
• точное определение концентрации ТТГ для установления патологии или нормы;
• возможность проведения полноценной диагностики на раннем сроке болезни;
• раннее обнаружение ЗППП;
• проведение ИФА возможно даже при температурных колебаниях окружающей среды;
• быстрый срок предоставления результата;
• удобство и простота проведения анализа;
• высокая чувствительность;
• реагенты для проведения исследования могут храниться около года;
• возможность проведения массового обследования в очагах инфекции;
• раннее выявление паразитов;
• отслеживание динамики прогрессирования инфекционного заболевания;
• минимальное влияние человеческого фактора;
• для анализа нужен небольшой объем биоматериала.

Недостатки

Главным недостатком иммуноферментного анализа крови считается то, что при проведении исследования врач заранее должен иметь предположение о природе болезни. При диагностике инфекционных заболеваний нельзя случайно найти возбудителя и установить его иммуноферментные свойства. Тест лишь способен указать на наличие антител в крови пациента, косвенно свидетельствующих о присутствии вредоносного микроорганизма.

Кроме того, при нарушении техники выполнения или неправильной подготовке, анализ может показать ложноположительный или ложноотрицательный результат. Исследование сыворотки крови ИФА – точный, но при этом дорогой метод, поэтому к нему следует обращаться в крайних случаях. Интерпретацию результатов надо доверять лишь квалифицированному специалисту.

Подготовка

Иммуноферментный анализ необходимо проводить, придерживаясь рекомендаций врача, т.к. на результаты исследования часто влияют разные внешние факторы. Основные правила подготовки к ИФА:

• венозную кровь надо сдавать строго натощак (в норме, последний прием пищи должен быть за 12 часов до исследования);
• необходимо накануне проведения анализа исключить прием любых лекарственных препаратов (если пациент принимает антигистаминные (противоаллергические) средства, следует проконсультироваться с доктором о том, за сколько до начала ИФА надо их отменить);
• нельзя перед обследованием курить и пить алкогольные напитки, т.к. это негативно повлияет на результат;
• следует обязательно выспаться перед анализом;
• надо исключить любые физические нагрузки, стрессовые факторы;
• диагностика большинства гормонов женской репродуктивной системы потребует взятия крови в определенные дни менструального цикла.

Как проводится

Для проведения иммуноферментного анализа у пациента берется кровь из локтевой вены строго натощак. Больной заранее должен сообщить врачу о наличии болезней и принимаемых препаратах, чтобы результаты исследования не были искажены. Как правило, все лекарства надо прекратить пить за 16 дней до ИФА. Ощущения при проведении процедуры похожи на взятие крови во время биохимического анализа.

Материал отправляют в лабораторию, где из крови выделяют сыворотку, в которой находятся антитела. Полученный состав помещают в пробирку с антигенами. Это могут быть самые разные аллергены (молоко, шерсть, пыльца, цитрусовые), возбудители вирусных и инфекционных болезней и другие. После получения реакции все остатки сыворотки сливают. При помощи специальных индикаторов специалисты определяют количество антител. Срок выполнения ИФА зависит от лаборатории. Как правило, результаты исследования могут предоставить в срок от двух дней до недели.

Иммуноферментный анализ крови помогает определить наличие в организме антител. Существуют несколько классов иммуноглобулинов:

1. IgM. Появляются самые первые после заражения. Наличие данных антител указывает на появление болезни в любом случае, т.к. у здорового человека этот класс отсутствует. Как правило, иммуноглобулины IgM присутствуют в крови примерно 6 недель.
2. IgA. Антитела содержатся в большом количестве в слизистых оболочках, защищая организм от проникновения патогенных микробов. Если у пациента присутствует данный класс, необходимо интенсивнее бороться с болезнью. Ведь иммуноглобулины А возникают лишь при хроническом заболевании. Исчезновение IgA свидетельствует об уничтожении инфекции.
3. IgG. Иммуноглобулины данного класса свидетельствуют о том, что человек либо является носителем инфекции, либо уже перенес заболевание. Данные антитела вырабатываются после IgM через месяц после заражения. Иммуноглобулины класса G могут присутствовать в организме на протяжении 5-6 лет, защищая его от рецидива заболевания, а при сифилисе такие антитела находятся пожизненно.

При проведении анализа ИФА в детском возрасте (до 1,5 лет) следует учитывать, что кровь ребенка содержит антитела IgG матери к инфекциям. Хотя это не означает, что малыш болен, скорее данный факт – норма. Наличие класса M свидетельствует о внутриутробной или приобретенной после рождения инфекции, т.к. антитела IgM матери не способны проникать в детский организм через плаценту. Расшифровка возможных комбинаций наличия или отсутствия антител 3 классов представлена в таблице:

Расшифровка	IgA	IgM	IgG
Отсутствует иммунитет к инфекции	–	–	–
Хроническая инфекция находится в стадии обострения	+	+	+
Присутствует постинфекционный или поствакцинальный иммунитет	–	–	+
Есть хроническая инфекция	+/-	–	+/-
Острая инфекция	-/+	+	-/+

Расшифровку результатов ИФА должен производить квалифицированный врач. Как правило, (+) говорит о положительном исходе анализа, а (-) – об отрицательном. Результат, который показывает отсутствие или наличие вещества, именуется качественным. Иногда его дополняет количественный, который отображает число различных веществ в организме. Часто тест-система имеет собственные референтные (соотносимые) значения. Превышение таких показателей означает наличие патологий у пациента.

Противопоказания

Кардинальных противопоказаний для проведения иммуноферментного исследования не выявлено. Иногда при беременности, когда у пациентки наблюдается непрерывное изменение гормонов в крови, может понадобиться неоднократное проведение анализа для более достоверного результата. Диагностический метод не рекомендуется использовать после:

• хирургических вмешательств;
• гемолиза (разрушения эритроцитов);
• переливания крови;
• взятия пункции или биопсии биологического материала.

Цена иммуноферментного анализа крови

Стоимость исследования ИФА зависит от политики медицинского учреждения, вида анализа и определяемого антигена, т.к. исходя из этих факторов, рассчитывается цена реагентных наборов и устанавливается сложность проведения исследования. Как правило, иммуноферментный анализ крови – это общедоступная процедура, средняя стоимость метода варьируется от 300 до 2000 рублей. Примерные цены на иммуноферментный анализ крови в Москве представлены в таблице:

Определение антител	Стоимость в рублях
Анти-Хламидия IgG	1000-1300
К цитомегаловирусу IgM/IgG	300-700
Антитела класса IgM к Хламидии	600
К кандиде	320-450
Антитела к трихомонаде	200-1500
К микоплазме	340-520
Антитела к хеликобактер	200-2450

Видео

Внимание! Информация, представленная в статье, носит ознакомительный характер. Материалы статьи не призывают к самостоятельному лечению. Только квалифицированный врач может поставить диагноз и дать рекомендации по лечению, исходя из индивидуальных особенностей конкретного пациента.

Нашли в тексте ошибку?

Выделите её, нажмите Ctrl + Enter и мы всё исправим!

Нашли в тексте ошибку?

Выделите её, нажмите Ctrl + Enter и мы всё исправим!

Анализ ИФА - что это такое: иммуноферментный анализ крови

С прогрессом современной медицины удается проводить более углубленную диагностику при подозрении на те или иные патологии у пациента. Одним из информативных методов лабораторного исследования стал ИФА анализ, который проводят методом забора венозной крови. То есть для пациента ничего в целом не меняется. А вот лаборант-анализатор ИФА проводит сложную технику исследования забранного биоматериала. В том, что такое анализы ИФА и, каковы тонкости применения ИФА метода в качестве диагностического, разбираемся в материале ниже.

Что такое иммуноферментный анализ?

Иммуноферментный анализ крови — это один из способов лабораторной диагностики, который основан исключительно на реакции под названием «антиген-антитело». Здесь стоит уяснить, что антиген — это чужеродное белковое соединение (молекула), попавшее в организм человека с паразитарной, вирусной или другой инфекцией. То есть, попросту вредитель. В свою очередь антитело — это иммунная клетка (иммуноглобулин), встающая на защиту организма человека при обнаружении в нем чужеродных молекул.

Выработку антител провоцируют сами же антигены, проникшие в организм человека. При вступлении в «битву» за здоровье организма антитела как бы помечают собой антигены, что при исследовании крови и видит лаборант. То есть в забранном биоматериале можно отследить не только наличие инфекции, но и ее следы уже после того, как организм полностью выздоровел.

При проведении анализа на ИФА лаборант может видеть такие иммуноглобулины к антигенам:

• Иммуноглобулины М (в результатах значатся как IgM). Свидетельствуют о том, что инфекционный процесс в организме только набирает свою силу. То есть инфицирование произошло совсем недавно;
• Иммуноглобулины G (значатся как IgG). Способствуют уничтожению антигенов через несколько дней после внедрения инфекции в организм человека. Иммуноглобулины G могут находиться в организме пациента достаточно долго, формируя иммунитет к определенному вирусу;
• Иммуноглобулины Е (значатся как IgЕ). Свидетельствуют о паразитарных инфекциях в организме. Он же говорит и об атопических реакциях при аллергии. При этом стоит знать, что проведение анализа ИФА дает результат с точностью 90% на паразитарные инфекции;
• Иммуноглобулины А (значатся как IgА). Максимально выступают на защиту слизистых оболочек пациента.

Таким образом, назначая иммуноферментный анализ крови пациенту, лечащий врач может отследить давность инфекции, степень ее прогрессирования или выявить наличие иммунитета к той или иной инфекции.

Процесс ИФА диагностики выглядит таким образом:

• Забранная венозная кровь приводится в лаборатории в состояние сыворотки крови;
• Затем лаборант использует специальный лоток с ячейками, в каждой из которых уже имеются все необходимые антигены. Достаточно просто капнуть в каждую ячейку сыворотку крови и отследить реакцию иммуноглобулинов (антител) на антигены. О наличии «нужной» реакции свидетельствует изменение цвета исследуемого материала. В дальнейшем лаборант изучает оптическую плотность исследуемой среды.

В целом иммуноферментный анализ на паразитов помогает выявить такие паразитарные патологии:

• Аскаридоз и энтеробиоз (аскариды и острицы);
• Трихинеллез;
• Описторхоз в острой и хронической формах;
• Лямблиоз;
• Амебиоз;
• Токсоплазмоз;
• Лейшманиоз в любой форме.

Важно: иммуноферментный анализ бывает как качественным, так и количественным. В первом случае лаборант лишь подтверждает или опровергает наличие искомого вещества в крови. Во втором случае в результате анализа указывают его концентрацию в организме пациента.

Недостатки метода

При всех достоинствах такого способа диагностики стоит понимать, что иммуноферментный анализ крови — не способ нахождения причины болезни пациента, а лишь метод подтверждения предполагаемого лечащим врачом диагноза. А ввиду того, что исследование является достаточно недешевым, использовать его нужно с умом. При этом результаты исследования должен трактовать только квалифицированный специалист.

Подготовка к анализу на паразитов

Важно понимать, что выявление паразитов через анализ крови требует определенной подготовки от пациента. Так, перед сдачей крови необходимо сделать следующее:

• За сутки до забора биоматериала нужно исключить из рациона жирную пищу, алкоголь и копчености;
• Кровь на иммуноферментный анализ крови на паразитов и другие инфекции следует сдавать с утра натощак;
• Перед сдачей крови запрещено курить минимум за 3-4 часа;
• В день забора крови желательно не нервничать и не прибегать к усиленным физическим нагрузкам.

Соблюдение этих правил позволит избежать ложноположительного результата на антитела к паразитам.

Расшифровка результатов

После того как мы разобрали аббревиатуру ИФА и что это такое ─ выяснили, стоит перейти к трактовке результатов. Здесь важно понимать, что если анализ проводили качественный, то результат будет лишь положительным или отрицательным. То есть диагностика либо подтверждает подозрения доктора относительно определенного диагноза, либо опровергает их. В этом случае в бланке будут стоять символы «+» или «-» соответственно.

Важно: отрицательный результат анализа не всегда свидетельствует об отсутствии инфекции. Дело в том, что антитела к антигенам могут формироваться в течение 14 дней после инфицирования и вполне вероятно, что они еще не сформированы.

В случае же если проводится количественный анализ, то здесь определяется вид антител, их количество и стадия активности. В частности при такой диагностике определяют антитела (иммуноглобулины) IgG и IgM, которые формируются в разные периоды прогрессирования инфекции. Самыми распространенными вариантами результатов в этом случае являются:

• Повышенный IgМ и полное отсутствие IgG. Такая картина свидетельствует о недавнем инфицировании и острой фазе течения патологии.
• Повышенная активность иммуноглобулинов обоих видов (IgМ и IgG). Говорит о давнем и хроническом протекании инфекционного процесса.
• Активность IgG и полное отсутствие IgМ. Инфицирование было не менее полугода назад и сейчас вирус пребывает в затяжной хронической стадии.
• Отсутствие антител IgG и IgA. Результат не определен.
• Отсутствие антител IgM, IgA и IgG. Свидетельствует об отсутствии иммунитета к определенной инфекции.
• Активность антител IgG, IgM и IgA говорит об обострении хронического процесса.

Помимо выявления типов антител лаборант в специальной графе бланка указывает и их количество на объем крови. Помните, разобравшись в том, что такое метод ИФА, не трактуйте результаты самостоятельно. Полученные результаты с точностью может интерпретировать только лечащий врач в зависимости от предполагаемого диагноза, выстраиваемого на основании клинической картины у пациента.

---

Смотрите также

• 
  Алебастр что это такое
• 
  Денвер стейк что это такое
• 
  Мастопексия что это такое
• 
  Симпатэктомия что это такое
• 
  Физический контакт это что такое
• 
  Парциальная эпилепсия что это такое
• 
  Фолликулярная опухоль щитовидной железы что это такое
• 
  Нмц по типу гиперполименореи что это такое
• 
  Садж что это такое фото
• 
  Бутовый камень что это такое фото
• 
  Остеоартроз тазобедренного сустава что это такое